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小蝴蝶昆蟲(chóng)培養基的使用要小心加謹慎

 更新時(shí)間:2023-02-03    點(diǎn)擊量:767
  小蝴蝶昆蟲(chóng)培養基的關(guān)鍵是培養基配方的開(kāi)發(fā),已有多種培養基用于支持昆蟲(chóng)細胞系的生長(cháng)。昆蟲(chóng)細胞培養所用培養基一般均補加FBS,血清提供了細胞生長(cháng)過(guò)程中所需的營(yíng)養物質(zhì)和微量元素,使細胞能健康生長(cháng)和傳代。但是FBS的使用也存在著(zhù)缺點(diǎn):價(jià)格高;每批血清的質(zhì)量不同,影響細胞的生長(cháng)和病毒復制;血清中的蛋白影響從培養的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難;血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲(chóng)培養基變得很復雜。因此,無(wú)論工業(yè)上或學(xué)術(shù)上,開(kāi)發(fā)無(wú)血清培養基都是必然的趨勢。
 
  由于在無(wú)血清培養基中含有從血清或動(dòng)物臟器中純化的蛋白成分,如胰島素、轉鐵蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分離純化的難度和成本。細胞在無(wú)血清低蛋白或無(wú)蛋白培養基環(huán)境中對剪切應力更為敏感,故需適當提高保護劑的濃度。無(wú)血清培養基的應用有時(shí)會(huì )降低重組蛋白的產(chǎn)量,在無(wú)血清培養基內,較高的細胞生長(cháng)密度與相對較低水平的重組蛋白產(chǎn)量這一事實(shí)表明,促進(jìn)細胞分裂的因子與促進(jìn)重組蛋白生產(chǎn)的桿狀病毒感染晚期起作用的因子是不盡相同的。
 
  小蝴蝶昆蟲(chóng)培養基旨在用于大規模擴增草地貪夜蛾(Spodoptera frugiperda)細胞系,也常用于通過(guò)桿狀病毒表達系統(BEVS)進(jìn)行蛋白表達。 IPL-41培養基是對原始IPL配方的改良,用于大規模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎培養基中加入了胎牛血清和TPB培養基(Tryptose Phosphate Broth),成功地實(shí)現了IPL-21 AE (III)細胞系的大規模連續培養。該培養基主要用于培養和維護鱗翅類(lèi)衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒。IPL-41培養基基礎也以用于無(wú)血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。
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