細胞培養，是人工創(chuàng )造與體內生長(cháng)相似的環(huán)境，使細胞生長(cháng)、繁殖并維持主要結構和功能的技術(shù)。培養基是一切體外培養的基礎，為細胞的生長(cháng)和代謝活動(dòng)提供了各種必需的營(yíng)養物質(zhì)。根據培養基的來(lái)源和組成成分，它的發(fā)展經(jīng)歷了三個(gè)階段，分別是天然培養基階段、合成培養基階段以及無(wú)血清培養基階段。那么你知道什么是液體培養基嗎？它的組分是什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

在20世紀50年代，當時(shí)體外培養普遍直接采用組織凝塊、生物性液體和組織提取液，如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸液等，這就是天然培養基階段。由于天然培養基的使用會(huì )帶來(lái)不可避免的病毒污染、批次間差異大等問(wèn)題，于是就有了合成培養基，其主要成分包括生長(cháng)因子、營(yíng)養物質(zhì)、緩沖劑、抗生素等。合成培養基最初的配方是MEM，由Eagle在1959年shou次提出，之后經(jīng)過(guò)不斷發(fā)展涌出了各種不同配方的優(yōu)質(zhì)合成培養基，包括M199、DMEM、IMDM、PRMI1640等，這些經(jīng)典培養基到現在依舊是實(shí)驗室中應用zui廣泛的。

按照物理性質(zhì)可將其分為：液體培養基、固體培養基、半固體培養基、脫水培養基。其中，液體培養基最為常見(jiàn)，它具有可進(jìn)行通氣培養或振蕩培養的優(yōu)勢，因為它的流動(dòng)性便于精確控制培養基的溶液溫度、營(yíng)養濃度和氣體含量等；它對細胞生長(cháng)時(shí)的附著(zhù)能力要求小，細胞可快速擴增；當需要大量細胞培養時(shí)也更經(jīng)濟高效。作為大家使用最為頻繁的細胞培養試劑，基礎液體培養基在細胞培養中起到關(guān)鍵作用。

基礎液體培養基的組分

為了滿(mǎn)足細胞的生長(cháng)需要，液體培養基一般都會(huì )含有水、能源物質(zhì)、氨基酸、維生素、無(wú)機鹽和pH指示劑等。此外，還可能含有血清或血清替代成分。

（1）水

液體細胞培養基中90 %以上的成份是水。細胞對水的品質(zhì)非常敏感，水的品質(zhì)將直接影響細胞培養的效果。因此，細胞培養用水須經(jīng)過(guò)純化，品質(zhì)應符合中國藥典注射用水標準或者超純水的標準。

（2）能源物質(zhì)

液體培養基的能源物質(zhì)以葡萄糖為主，少數含有半乳糖、果糖、甘露糖等。根據葡萄糖含量不同區分，代謝消耗較快的病理狀態(tài)細胞多選用高糖（4.5 g/L）培養基，單抗細胞融合時(shí)使用低糖（1.0 g/L）培養基。當葡萄糖不足時(shí)，可以使用丙酮酸鈉為細胞提供碳源，并且部分細胞系對丙酮酸鈉具有依賴(lài)性。

（3）氨基酸

氨基酸是蛋白質(zhì)合成的基礎，不同細胞需要的氨基酸類(lèi)型具有差異性。谷氨酰胺是一種氨基酸，也是一種重要能源物質(zhì)，但要注意它在溶液中不穩定，代謝產(chǎn)物會(huì )損傷敏感細胞系。

（4）維生素

維生素參與酶構成，是維持細胞生長(cháng)的生物活性物質(zhì)，在細胞代謝中起調節及控制作用。

（5）無(wú)機鹽

無(wú)機鹽的主要作用就是維持滲透壓平衡，調節pH。

（6）緩沖體系

細胞培養過(guò)程中造成培養基 pH 波動(dòng)的主要物質(zhì)是細胞代謝產(chǎn)生的CO2，液體培養基通常采用NaHCO3或HEPES緩沖體系來(lái)為細胞生長(cháng)提供穩定的pH環(huán)境。

（7）酚紅：酸堿指示劑。

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