HEK293細胞轉染試劑

簡(jiǎn)要描述：HEK293細胞轉染試劑，PEI Prime是以一種陽(yáng)離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine，PEI)為載體的基因轉染試劑。

產(chǎn)品型號：Prime-AQ100-100ML
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
更新時(shí)間：2023-03-15
訪(fǎng) 問(wèn) 量：851

詳情介紹

產(chǎn)品名稱(chēng)：HEK293細胞轉染試劑

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
PEI線(xiàn)性轉染試劑（PEI Prime Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine）：PEI Prime是以一種陽(yáng)離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine，PEI)為載體的基因轉染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結合，并賦予凈陽(yáng)離子電荷，使DNA進(jìn)入細胞。PEI Prime是一種高性能轉染試劑，利用PEI的特性旨在實(shí)現高產(chǎn)量，可重復性和可擴展的瞬時(shí)基因表達。

應用范圍：

PEI轉染試劑能夠高效率轉染多種細胞系，包括貼壁細胞和懸浮細胞。此外，PEI是用于HEK293和CHO懸浮細胞轉染的試劑。PEI轉染試劑是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的合適選擇，包括重組蛋白，抗體和病毒。

PEI線(xiàn)性轉染試劑產(chǎn)品優(yōu)勢：

1. 低毒，高效

2. 操作簡(jiǎn)單，高性?xún)r(jià)比

3. 可提供可靠、具有可重復性的轉染結果

4. 適用于快速、高通量轉染流程

轉染步驟:

-以HEK293貼壁細胞為例，步驟如下：

1. 細胞接種：細胞密度2-6 x106 cells/mL。

2. 質(zhì)粒的準備：在5％最終培養體積的DMEM或培養基中，每106個(gè)細胞稀釋1.0 ug pDNA。

3. PEI的準備：在5％最終培養體積的DMEM或培養基中，每106個(gè)細胞稀釋3.0 ug PEI Prime，混勻。

4. 通過(guò)快速，短暫渦旋或顛倒數次試管，將pDNA和PEI Prime溶液混合在一起。

5. 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。

6. 一邊旋轉板，一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細胞中。

7. 于37℃ CO2培養箱中培養。

轉染的優(yōu)化：

為達到高轉染效率和低細胞毒性的理想結果，可以進(jìn)行如下優(yōu)化：

參數	范圍
PEI濃度	3.50-6.50mg/（L final culture）
DNA濃度	0.75-1.5mg/（L final culture）
PEI/DNA混勻時(shí)間	5.0-15.0minutes

與市場(chǎng)同類(lèi)品牌的PEI轉染效率的對比：

使用PEI Prime（PEI:DNA濃度比3：1）或某國外品牌PEI，用CMV-SEAP質(zhì)粒轉染20ml 含HEK293懸浮細胞的培養物。轉染后5天，使用磷酸酶報告染料和UV / Vis檢測SEAP表達水平。數據表示占某國外品牌PEI的SEAP表達水平的百分比。結果顯示我們的PEI Prime 的轉染效率比國外同類(lèi)廠(chǎng)家高出40%。

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