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一、RD Systems重組人干細胞因子簡(jiǎn)介
純度:>97%,經(jīng)SDS-PAGE銀染色顯示,考馬斯藍染色定量密度測定。
內毒素水平:LAL法每1 μg蛋白質(zhì)<1.0 EU。
活性:使用TF?1人紅白血病細胞進(jìn)行細胞增殖試驗。(1989) .細胞生理學(xué)雜志。140:323。該效應的ED50為1?5 ng/mL。
來(lái)源:大腸桿菌衍生的人SCF/c-kit配體蛋白。Glu26-Ala189,帶n端Met。
氨基酸序列分析:Met
預測分子量:19 kDa
SDS-PAGE:17-18 kDa,在還原條件下。
二、干細胞因子(SCF)背景介紹
干細胞因子(SCF)是一種有效的造血生長(cháng)因子,在調節胚胎和成人造血過(guò)程中都是必需的。SCF蛋白促進(jìn)多種細胞類(lèi)型的存活、分化和動(dòng)員,包括髓細胞、紅細胞、巨核細胞、淋巴細胞、生殖細胞、和黑素細胞祖細胞。SCF是肥大細胞和嗜酸性粒細胞的主要生長(cháng)和激活因子。SCF通過(guò)增加心肌細胞和血管通道的數量,幫助心肌梗死后心功能的恢復。干細胞因子是體外臨床應用的重要細胞因子。SCF與其他細胞因子一起用于造血干細胞(hsc)的培養和擴增以及髓系和紅系祖細胞的增殖和分化。
成熟干細胞因子由一個(gè)189個(gè)氨基酸的胞外結構域(ECD)、一個(gè)23個(gè)氨基酸的跨膜結構域和一個(gè)36個(gè)氨基酸的細胞質(zhì)尾部組成。ECD顯示N鏈和o鏈糖基化。SCF蛋白以?xún)煞N形式存在,一種是膜結合形式,另一種是蛋白水解處理的可溶性形式,缺乏跨膜結構域和細胞質(zhì)尾部。可溶性形式是通過(guò)在細胞外近膜區域的兩個(gè)交替位點(diǎn)上的蛋白水解裂解產(chǎn)生的,釋放出25 kDa的可溶性SCF蛋白,這與Steel-dickie突變小鼠產(chǎn)生的wei一形式相當。人類(lèi)SCF也存在一種交替剪接的異構體,缺少包含初級蛋白水解識別位點(diǎn)的28個(gè)氨基酸。這種形式不能被切割,只是膜結合。
SCF與C-kit (CD117)結合。C-kit在許多不同類(lèi)型的細胞上表達,包括造血干細胞、肥大細胞、生殖細胞和黑素細胞。SCF與C-kit結合可誘導受體二聚化和細胞質(zhì)域酪an酸殘基的自磷酸化。酪an酸磷酸化啟動(dòng)多種信號通路,包括RAS、PI3激酶、Src和JAK/STAT。干細胞因子在哺乳動(dòng)物中高度保守。人SCF蛋白序列與狗、貓、小鼠和大鼠SCF具有79% - 87%的同源性。大鼠SCF對小鼠和人細胞都有活性,而人SCF對小鼠細胞的活性較弱。
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