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簡(jiǎn)要描述：BrainBits小鼠下丘腦培養試劑盒，包含從新鮮組織開(kāi)始培養所需的一切。E18組織用2ml含B27的THRYVE胚胎儲存介質(zhì)運送。
產(chǎn)品型號：廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商更新時(shí)間：2024-10-29訪(fǎng) 問(wèn) 量：106一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
BrainBits小鼠下丘腦培養試劑盒，產(chǎn)品組分：1 E18小鼠下丘腦、12mL NbAstro、6.2mg木瓜蛋白酶、5mL HE-Ca 、1個(gè)帶橡膠球的火拋光移液、1對PDL涂層蓋板。
二、產(chǎn)品使用
（一）制劑（無(wú)菌罩室溫）
1. 將6mg無(wú)菌木瓜蛋白酶（PAP 6mg）溶解于3ml THRYVE Embryonic-CaCl中，制備細胞解離液，最終工作濃度為
2毫克/毫升木瓜蛋白酶。在30℃下孵育10分鐘使其溶解。放入冰箱或冰中備用。組織和木瓜蛋白酶必須處于相同的溫度
（根據處理組織的數量，可能需要幾個(gè)單位）。
2. 將80µl臺普蘭藍（Sigma T8154）加入0.5ml試管中進(jìn)行第9步。
（二）細胞分散（無(wú)菌罩室溫）：
1. 用2ml移液管，用最少的培養基小心地將組織轉移到木瓜蛋白酶上。將THRYVE胚胎wanquan移植到一個(gè)新的無(wú)菌15ml試管中
保存到步驟3。
2. 組織與木瓜蛋白酶在30℃下孵育10分鐘。輕輕地旋轉每2分鐘或使用加熱搖振板在30℃和150rpm。
3. 用2ml移液管從木瓜蛋白酶中除去帶有少量培養基的組織，并從步驟1中返回THRYVE胚胎wanquan培養基。
4. 使用硅化巴斯德移液器，將組織分散不超過(guò)10倍或90%，避免產(chǎn)生氣泡。可選：加入400µl 1mg/ml DNase I溶液（StemCell Technologies 07469）加入細胞漿液中，在室溫下孵育15分鐘，輕彈或旋轉。
5. 讓未分散的碎片靜置1分鐘。
6. 將含有分散細胞的上清液轉移到15ml無(wú)菌管中。留下約50μl含有碎片的THRYVE胚胎wanquan體。可選用70µm濾池過(guò)濾細胞液。
7. 旋轉1100rpm (200 x G) 1分鐘。丟棄上清，留下含有微球的約50μl THRYVE胚胎wanquan液。
8. 分散細胞顆粒（用手指或管輕彈管底部），重懸于1ml NbActiv1™中。
9. 取20μl細胞液加入含有80μl臺盼藍（1:5稀釋?zhuān)┑?/span>0.5ml試管中，或按實(shí)驗室現行計數程序計數。
10. 使用血細胞計（計算細胞/ml）或使用當前的實(shí)驗室程序計數細胞。
（三）細胞電鍍（無(wú)菌罩室溫）：
1. 用NbActiv1™稀釋0.2ml/cm2的細胞，并以16,000個(gè)細胞/cm2或所需濃度進(jìn)行板載。
2. 37℃，5% CO2, 9% O2, 95%濕度（或環(huán)境O2）孵育。
3. 4天后，神經(jīng)元顯示軸突和樹(shù)突；突觸和動(dòng)作電位開(kāi)始于7天。
4. 每3-4天用新鮮的37℃CO2平衡NbActiv1™更換一半的培養基。
（四）可行性分析:
1. 用37℃HBSS （0.2ml/cm2底物）沖洗兩次。
2. 用15mg/ml雙醋酸熒光素丙酮原液和4.6mg/ml碘化丙啶水原液配制染料混合物，各稀釋15µl，加入1.5ml HBSS（1:100稀釋?zhuān)?/span>
3. 在步驟1中加入的0.2ml HBSS中加入20µl染料混合物（1:10稀釋?zhuān)?/span>
4. 約1分鐘后，使用適合熒光素熒光的藍色激勵（綠色細胞）計數活細胞。用綠色激勵計數死細胞碘化丙啶熒光（小紅核）。
5. 生存能力=（綠色細胞/單位面積）/（總細胞數/單位面積）或生存=綠色細胞/（綠色+紅色細胞）。
三、產(chǎn)品目錄表
SKU | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 產(chǎn)品品牌 |
KTC57EHT | 小鼠下丘腦培養試劑盒 | Transnetyx Tissue BrainBits |
三、代理簡(jiǎn)介
BrainBits小鼠下丘腦培養試劑盒——天津益元利康生物科技有限公司！
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