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022-66387942化學(xué)法轉染技術(shù)已廣泛應用于細胞的穩定或瞬時(shí)轉染,那么你知道不同化學(xué)轉染方法的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn)是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
一、陽(yáng)離子脂質(zhì)體
優(yōu)點(diǎn):
1.操作快速簡(jiǎn)單。
2.結果可重復。
3.轉染效率高。
4.可轉染DNA,RNA和蛋白質(zhì)。
5.適用于生產(chǎn)瞬時(shí)和穩定的蛋白質(zhì)。
6.可用于體內轉染。
缺點(diǎn):
1.需進(jìn)行條件優(yōu)化(一些細胞系對陽(yáng)離子脂質(zhì)體較敏感)。
2.有些細胞系不容易轉染。
3.血清的存在干擾復合物的形成,導致低轉染效率。
4.培養基中血清的缺失會(huì )增加細胞毒性。
二、磷酸鈣共沉淀
優(yōu)點(diǎn):
1.便宜且容易獲得。
2.適用于生產(chǎn)瞬時(shí)和穩定的蛋白質(zhì)。
3.轉染效率高(不限制細胞系)。
缺點(diǎn):
1.需要仔細制備試劑 – CaPO4溶液對pH,溫度和緩沖鹽濃度的變化敏感。2.可重復性較差。
3.有細胞毒性,尤其對原代細胞。
4.不能采用RPMI培養基,由于其含高濃度的磷酸鹽。
5.不適用于動(dòng)物體內轉染。
三、葡聚糖:
優(yōu)點(diǎn):
1.操作簡(jiǎn)單。
2.結果可重復。
3.便宜。
缺點(diǎn):
1.對某些細胞有化學(xué)毒性。
2.只限于瞬時(shí)轉染。
3.轉染效率低,尤其在原代細胞中。
四、其他陽(yáng)離子聚合物
優(yōu)點(diǎn):
1.在血清中穩定,對溫度不敏感。
2.高轉染效率(限制細胞系)。
3.結果可重復。
缺點(diǎn):
1.對某些細胞有毒性。
2.不能生物降解(樹(shù)枝狀大分子)。
3.只限于瞬時(shí)轉染。
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